基因敲入小鼠

基因敲入可以在目的基因位置引入特定的突變或外源基因。比如在目的基因上引入點(diǎn)突變(模擬人類(lèi)遺傳疾病模型) ；或?qū)?bào)告基因(如EGFP，mRFP，mCherry，mYFP，或LacZ等)通過(guò)同源重組的方式引入目的基因的特定位點(diǎn)，從而可以通過(guò)報(bào)告基因來(lái)跟 蹤目標(biāo)基因的表達(dá)。也可以用報(bào)告基因取代小鼠本身的基因，使KO/KI發(fā)生。

應(yīng)用

1、用于藥物篩選相關(guān)研究；

2、用于信號(hào)通路的研究；

3、用于示蹤的相關(guān)研究。

基因敲入小鼠

建系原則與流程

1、去除抗性基因 Neo：選擇陽(yáng)性TurboKnockout KI小鼠與野生型小鼠雜交，獲得去除打靶載體中的 Neo 基因的雜合子F1 代小鼠；

2、再挑選一對(duì)雜合子F1 代小鼠進(jìn)行自交，通過(guò) PCR 鑒定篩選得到去除Neo的F2代純合子KI小鼠。

野生型小鼠雜交

TurboKnockout基因敲除：實(shí)現(xiàn)跨越“嵌合體”階段且自刪除Neo，減少兩代繁育時(shí)間

基于ES打靶技術(shù)的TurboKnockout技術(shù)采用了獨(dú)特的建系和基因改造技術(shù)，建立了具有高效遺傳優(yōu)勢(shì)的TurboKnockout ES細(xì)胞系，通過(guò)特定胚胎發(fā)育階段的顯微注射，使TurboKnockout ES細(xì)胞****代替內(nèi)源ES細(xì)胞，從而實(shí)現(xiàn)跨越“嵌合體”階段，把ES打靶構(gòu)建周期縮短至6-8個(gè)月。并且TurboKnockout采用獨(dú)特的Self-deleting Neo Cassette所獲得的TurboKnockout小鼠與任何品系小鼠交配，都可以****自刪除Neo。也就是說(shuō)，TurboKnockout不僅實(shí)現(xiàn)跨越“嵌合體”階段，還能真正自刪除Neo，從而快速獲得去除Neo的雜合子小鼠。